알렌드로네이트나트륨
C4H12NNaO7P2·3H2O 325.12
포스폰산, (4-아미노-1-하이드록시부틸리덴)비스-, 일나트륨염, 삼수화물.
삼수소나트륨(4-아미노-1-히드록시부틸리덴)디포스포네이트, 삼수화물 [121268-17-5].
» 알렌드로네이트 나트륨은 건조 기준으로 계산하여 C4H12NNaO7P2를 98.0% 이상 102.0% 이하로 함유합니다.
포장 및 보관- 잘 닫힌 용기에 보관하세요. 실온에서 보관하세요.
USP 참조 표준<11>-
USP 알렌드로네이트 나트륨 RS
신분증-
A: 적외선 흡수<197M>.
B: 나트륨<191> 화염 시험 요건을 충족합니다.
건조감량<731>- 140°C에서 수은 5mm를 초과하지 않는 압력으로 건조하여 무게를 일정하게 유지합니다. 무게가 16.1% 이상 17.1% 이하로 손실됩니다.
중금속, 방법 III<231>: 0.001%.
크로마토그래피 순도-
붕산염 용액 및 희석제- 분석의 지시에 따라 준비합니다.
완충용액- 구연산나트륨이수화물 5.88g 및 무수이염기인산나트륨 2.84g을 2L 메스플라스크에 넣고 물로 표선까지 희석하여 혼합한다. 인산을 사용하여 pH 8로 조정하고 용액을 0.5μm 이상의 다공성을 갖는 필터에 통과시킵니다.
9-플루오레닐메틸 클로로포메이트 용액- mL당 약 4mg의 9-플루오레닐메틸 클로로포메이트를 함유한 아세토니트릴 용액을 준비합니다. 사용 직전에 이 용액을 새로 준비하십시오.
솔루션 A- 완충 용액과 아세토니트릴(17:3)의 여과 및 탈기 혼합물을 준비합니다.
솔루션 B- 아세토니트릴과 완충 용액(7:3)의 여과 및 탈기 혼합물을 준비합니다.
이동상- 크로마토그래피 시스템에 대한 지침에 따라 용액 A와 용액 B의 다양한 혼합물을 사용합니다. 필요한 경우 조정하십시오(크로마토그래피<621>의 시스템 적합성 참조).
표준원액- mL당 약 0.6mg의 알려진 농도를 갖는 희석제에 USP 알렌드로네이트 나트륨 RS 용액을 준비합니다.
표준용액- 표준 원액 5.0mL를 붕산염 용액 5mL가 들어 있는 50mL 폴리프로필렌 스크류 캡 원심분리 튜브에 옮깁니다. 아세토니트릴 5mL와 9-플루오레닐메틸클로로포르메이트 용액 5mL를 첨가하고 45초간 흔들어줍니다. 실온에 30분간 방치해 주세요. 염화메틸렌 20 mL를 넣고 1분간 세게 흔들어 섞는다. 5~10분 동안 원심분리한 후 상부의 투명한 물층 일부를 사용합니다.
희석표준액- 표준원액의 일부를 희석제로 희석하여 약 0.6 µg/mL의 알려진 농도를 갖는 용액을 얻습니다. 이 액 5 mL를 취하여 50 mL 폴리프로필렌나사형 원심분리관으로 시작하여 표준용액의 지시에 따라 진행한다.
시약 블랭크- 희석액 5.0mL를 사용하여 "50mL 폴리프로필렌, 나사캡 원심분리관"부터 시작하여 표준용액의 지시에 따라 진행합니다.
테스트 솔루션- 이 약 약 30 mg을 정확하게 달아 50 mL 용량플라스크에 넣고 희석액을 넣어 녹여 표선까지 희석하여 혼합한다. 이 용액 5.0mL를 사용하여 "50mL 폴리프로필렌, 나사캡형 원심분리관"부터 시작하여 표준용액의 지시에 따라 진행한다.
크로마토그래피 시스템(크로마토그래피<621> 참조)- 액체 크로마토그래프에는 266-nm 검출기와 패킹 L21이 포함된 4.1-mm × 25-cm 컬럼이 장착되어 있습니다. 유속은 분당 약 1.8mL입니다. 컬럼 온도는 약 45도로 유지됩니다. 크로마토그래프는 다음과 같이 프로그래밍됩니다.
시간(분) 용액 A(%) 용액 B(%) 용출
0 100 0 평형
0-15 100→50 0→50 선형 기울기
15-25 50→0 50→100 선형 기울기
25-27 0→100 100→0 선형 기울기
27-32 100 0 등용매
표준액과 희석표준액을 크로마토그래피하여 절차에 따라 피크반응을 기록한다. 표준액 크로마토그램의 주피크에 대한 테일링인자는 2.0 이하이다. 희석된 표준 용액의 크로마토그램에서 해당 위치의 피크는 3 이상의 신호 대 잡음비로 검출 가능합니다.
절차- 검액과 공시약을 같은 부피(약 20μL)씩 크로마토그래피에 따로 주입하고 크로마토그램을 기록하고 모든 피크에 대한 반응을 측정한다. 시약 바탕에서 얻은 피크에 해당하는 피크는 무시하십시오. 다음 공식에 따라 알렌드로네이트 나트륨 부분에서 각 불순물의 백분율을 계산합니다.
100(리/rs)
여기서 ri는 각 불순물 피크의 면적이고 rs는 모든 불순물 피크와 주 피크의 합입니다. 개별 불순물은 0.1% 이하, 전체 불순물은 0.5% 이하로 발견됩니다.
분석-
완충용액- 구연산나트륨이수화물 14.7g과 무수이염기인산나트륨 7.05g을 1L 메스플라스크에 넣고 물로 표선까지 희석한 후 인산으로 pH 8로 조정한다.
희석제- 1L 메스플라스크에 구연산나트륨이수화물 29.4g을 물에 녹이고 물로 표선까지 희석하여 섞는다.
붕산염 용액- 1L 메스플라스크에 붕산나트륨 19.1g을 물에 녹이고 물로 희석하여 혼합한다.
9-플루오레닐메틸 클로로포메이트 용액- mL당 약 0.5mg의 9-플루오레닐메틸 클로로포메이트를 함유한 아세토니트릴 용액을 준비합니다. 사용 직전에 이 용액을 새로 준비하십시오.
이동상- 완충 용액, 아세토니트릴 및 메탄올(70:25:5)의 여과 및 탈기 혼합물을 준비합니다. 필요한 경우 조정하십시오(크로마토그래피<621>의 시스템 적합성 참조).
표준재고 준비- mL당 약 0.1mg의 알려진 농도를 갖는 희석제에 USP 알렌드로네이트 나트륨 RS 용액을 준비합니다. 이 용액에 있는 무수 알렌드로네이트 나트륨의 농도 CS를 계산하십시오.
표준 준비- 표준 원액 5.0mL를 5mL의 붕산염 용액이 들어 있는 50mL 폴리프로필렌 나사형 원심분리 튜브에 옮깁니다. 9-플루오레닐메틸 클로로포르메이트 용액 5 mL를 첨가하고 30초 동안 흔듭니다. 실온에서 25분 동안 방치합니다. 염화메틸렌 25 mL를 넣고 1분간 세게 흔들어 섞는다. 5~10분 동안 원심분리합니다. 투명한 상부 수층의 일부를 사용합니다.
시약 블랭크- 5.0 mL의 희석제를 사용하여 "50-mL 폴리프로필렌, 나사캡 원심분리 튜브로"부터 시작하여 표준 준비에 지시된 대로 진행합니다.
분석 스톡 준비- 이 약 약 25 mg을 정확하게 달아 250 mL 용량플라스크에 넣고 희석액을 넣어 녹여 표선까지 희석하여 혼합한다.
분석 준비- 5.0 mL의 Assay Stock 준비를 사용하여 "50-mL 폴리프로필렌, 나사캡 원심분리 튜브"부터 시작하여 표준 준비에 대한 지시에 따라 진행합니다.
크로마토그래피 시스템(크로마토그래피<621> 참조)- 액체 크로마토그래프에는 266-nm 검출기와 패킹 L21이 포함된 4.1-mm × 25-cm 컬럼이 장착되어 있습니다. 유속은 분당 약 1.2mL입니다. 컬럼 온도는 약 35℃로 유지됩니다. 표준 준비를 크로마토그래피하고 절차에 지시된 대로 피크 반응을 기록합니다. 컬럼 효율은 이론단수 1500개 이상, 테일링 인자는 1.5 이하, 반복 주입에 대한 상대 표준 편차는 2.0% 이하입니다.
절차 - 동일한 부피(약 10μL)의 표준액, 검정액 및 공시약을 별도로 크로마토그래피에 주입하고 크로마토그램을 기록하고 주요 피크에 대한 반응을 측정합니다. 다음 공식에 따라 알렌드로네이트 나트륨 부분에서 C4H12NNaO7P2의 양을 mg 단위로 계산합니다.
DCS(rU/rS)
여기서 D는 분석 스톡 준비를 위한 희석 인자입니다. CS는 표준 재고 준비에 정의된 대로입니다. rU 및 rS는 각각 분석 시료와 표준 시료 시료에서 얻은 알렌드론산의 피크 면적 반응입니다.