염화콜린
C5H14ClNO 139.62
(2-하이드록시에틸)트리메틸암모늄 클로라이드;
2-하이드록시-N,N,N-트리메틸에탄아미늄 클로라이드 [67-48-1].
정의
염화콜린에는 무수물 기준으로 계산된 염화콜린(C5H14ClNO)이 NLT 99.0% 및 NMT 100.5% 함유되어 있습니다.
식별
• A. 적외선 흡수 <197K>
• B. 식별 테스트-일반, 염화물<191>: 용액(20개 중 1개)이 요구 사항을 충족합니다.
분석
• 절차
샘플: 120mg
적정 시스템
(적정법 <541> 참조)
모드: 직접 적정
적정제: 0.1 N 질산은 VS
종말점 탐지: 전위차
공란: 물 35mL. 아세트산 3방울을 첨가한다.
분석: 샘플을 물 35mL에 녹이고 아세트산 3방울을 첨가합니다. 적정제로 적정합니다.
채취한 샘플에서 염화콜린(C5H14ClNO)의 백분율을 계산합니다.
결과 = [(V B) × N × F × 100]/W
V = 샘플 적정제 용량(mL)
B = 빈 적정제 부피(mL)
N = 적정제 정상도(mEq/mL)
F = 등가 인자, 139.6 mg/mEq
W = 샘플의 중량(mg)
허용 기준: 무수물 기준 99.0%-100.5%
불순물
• 잔류용매<467>: 1,4-디옥산의 한도가 10 µg/g이라는 점을 제외하고 요건을 충족합니다.
• 점화 잔류물<281>: NMT 0.05%
• 비소, 방법 I<211>
분석: 물 30mL와 염산 5mL를 첨가하여 시료를 용해시킵니다.
허용 기준: NMT 2ppm
• 납<251>
[참고-디티존추출액과 디티존표준액을 조제할 때에는 클로로포름 대신 염화메틸렌을 사용한다. ]
A액 : 수산화나트륨용액(1 → 2) 8.4g을 플라스틱병에 넣고 수산화암모늄시액 100mL를 넣어 섞는다.
표준용액 : 희석한 납표준용액 1.0 mL를 물 25.0 mL가 담긴 분별깔대기에 옮긴다.
검액 : 물 25.0mL가 담긴 분액깔대기에 염화콜린 3.00g을 녹인다.
분석
시료: 표준용액 및 시료용액
표준액과 검액에 각각 구연산암모늄용액 6.0 mL, 시안화칼륨용액 3.0 mL를 넣는다. 생성된 각 용액을 디티존 추출 용액 5.0-mL 부분으로 3회 추출하고 60초 동안 흔들어 각 추출물을 다른 분리기로 배출합니다. 혼합된 디티존 용액을 질산(1 → 100) 20.0mL와 함께 30초 동안 흔든 다음 염화메틸렌 층을 버립니다. 암모니아-시안화물 용액 6.0mL, 용액 A 2mL, 표준 디티존 용액 10mL를 첨가하고 45초 동안 흔들어줍니다. 상이 분리되도록 하고, 적합한 분광 광도계를 사용하여 510 nm에서 하부 층의 흡광도를 측정합니다.
허용 기준: 검액의 흡광도는 NMT 표준액의 흡광도(NMT 0.3ppm)입니다.
• 중금속, 방법 II<231>: NMT 10ppm
• 총 아민의 한도
표준용액 : 물에 용해된 트리메틸아민염산염 500 µg/mL
검액 : 이 품목 10.0g을 피복교반자가 들어 있는 비이커에 취하고 물 170mL 및 수산화나트륨시액 30.0mL를 넣어 녹을 때까지 교반한다.
시스템 적합성 원액: 물에 용해된 트리메틸아민 염산염 10 µg/mL
시스템 적합성 용액 : 시스템 적합성 원액 10.0 mL를 플라스틱으로 코팅한 교반자가 들어 있는 비이커에 취하고 물 160 mL 및 수산화나트륨시액 30.0 mL를 넣어 녹을 때까지 교반한다.
전극 시스템: 최소 재현성 ±0.1mV(pH 791 참조)로 전위를 측정할 수 있는 pH 미터에 연결된 내부 참조가 있는 가스 감지, 암모니아 특정 지시 전극을 사용합니다.
표준반응선 : 수산화나트륨시액 30.0mL와 물 170mL를 섞는다. 플라스틱으로 코팅된 교반봉을 넣고 전극을 용액에 넣고 전위를 mV 단위로 기록한다. 계속 저어주며 표준용액 0.200, 0.600, 1.00, 2.00mL를 5분 간격으로 첨가하고 첨가 후 전위를 기록한다. 누적 트리메틸아민 염산염 농도(0.50, 1.50, 2.50 및 5.00μg/mL) 대 전위(mV)의 로그를 플롯하고 전극에 대한 표준 반응 선의 기울기(S)를 결정합니다.
시스템 적합성
샘플: 시스템 적합성 솔루션
시료 용액을 시스템 적합성 용액으로 교체하고 아래 공식에서 W를 10mL에 해당하는 V로 교체하는 것을 제외하고는 분석 지침에 따라 진행합니다.
적합성 요구 사항: 표준 용액을 0.4-mL 누적 추가하면 총 변화는 NLT 10mV입니다. 발견된 트리메틸아민 염산염의 양은 8.5-11.5 µg/L입니다.
분석
시료: 표준용액 및 시료용액
전극을 헹구고 검체 용액에 넣고 저은 다음 전위를 mV 단위로 기록합니다. 표준용액 0.100 mL를 넣고 전위를 기록한다. 표준용액 0.100 mL를 더 넣고 전위를 기록한다. [참고 – 표준 용액을 두 번째 첨가한 후 총 변화가 10mV 미만인 경우 세 번째 분취량 0.200mL를 추가합니다.]
채취한 샘플 부분에서 트리메틸아민 염산염으로서 총 아민의 함량(μg/g)을 계산합니다.
결과 = (CS × VA)/[(F 1) × W]
CS = 표준용액의 농도(μg/mL)
VA = 검액에 첨가한 표준액의 총량(mL)
W = 검액 조제에 채취한 염화콜린의 중량(g)
F = 보정 계수, 다음 공식으로 계산:
F = 역로그 [(mVF mV0)/S]
mVF = 표준 용액 첨가 후 최종 판독값(mV)
mV0 = 샘플 용액의 초기 판독값(mV)
S = 전극에 대한 표준 반응선의 기울기
허용 기준: NMT 10 µg/g
• 크로마토그래피 순도
완충 용액: 무수 이염기성 인산나트륨 7.1g/L. 인산을 사용하여 pH 2.5로 조정합니다.
이동상: 완충액 및 아세토니트릴(7:3)
표준액 : USP 염화콜린표준품 NMT 100mg을 24mL 뚜껑이 있는 유리병에 옮기고 염화3,5디니트로벤조일 400mg과 아세토니트릴 10mL를 첨가한다. 바이알의 뚜껑을 닫고 55℃로 가열한 후 2시간 동안 계속 가열합니다. 실온으로 식힌 후 물 5mL를 첨가한다. 5분간 방치합니다. 용액을 25-mL 부피 플라스크에 정량적으로 옮기고 아세토니트릴을 사용하여 부피까지 희석합니다. 이 용액을 이동상으로 희석하여 2.0 µg/mL 농도의 USP 염화콜린 RS를 얻습니다.
샘플 용액: 염화콜린 110mg을 24mL 캡이 달린 바이알에 옮깁니다. 120도에서 2시간 동안 건조시킵니다. 3,5-디니트로벤조일 클로라이드 400mg과 아세토니트릴 10mL를 첨가합니다. 바이알의 뚜껑을 닫고 55℃로 가열한 후 2시간 동안 계속 가열합니다. 실온으로 식힌 후 물 5mL를 첨가한다. 5분간 방치합니다. 용액을 50-mL 용량 플라스크에 정량적으로 옮기고 이동상을 사용하여 부피까지 희석합니다. 용액 2.0mL를 25mL 용량 플라스크에 피펫으로 넣고 이동상을 사용하여 부피만큼 희석합니다.
크로마토그래피 시스템
(크로마토그래피<621>, 시스템 적합성 참조)
모드: LC
검출기: UV 208 nm
컬럼: 4.6-mm × 25-cm; 포장 L7
컬럼 온도: 30
유속: 1.0mL/분
주입 크기: 20 µL
시스템 적합성
샘플: 표준 용액
적합성 요구 사항
용량계수(k'): NLT 2
상대 표준 편차: NMT 5%, 콜린 유도체 피크로부터 결정됨
분석
시료: 표준용액 및 시료용액
섭취한 염화콜린 부분에서 각 불순물의 백분율을 계산합니다.
결과 = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = 샘플 용액의 콜린 유도체 및 3,5-디니트로벤조산에 대한 반응을 제외한 각 불순물에 대한 피크 반응
rS = 표준 용액의 콜린 유도체에 대한 피크 반응
CS = 표준 용액 내 USP 염화콜린 RS의 농도(mg/mL)
CU = 시료 용액의 염화콜린 농도(mg/mL)
합격기준
개별 불순물: NMT 0.3%
총 불순물: NMT 2.0%
특정 테스트
• pH<791>: 4.0-7.0, 용액(1/10)
• 수분 측정, 방법 I<921>: NMT 0.5%
추가 요구 사항
• 포장 및 보관: 잘 밀봉된 용기에 보관하세요.
• USP 참조 표준<11>
USP 염화콜린 RS