겐타마이신 황산염
[1405-41-0]
정의
Micromonospora purpurea가 생산하는 항균 물질의 황산염 혼합물로, 주요 성분은 겐타마이신 C1, C1a, C2, C2a 및 C2b입니다.
함량: 최소 590IU/mg(무수 물질).
캐릭터
외관 : 흰색 또는 거의 흰색의 흡습성 분말.
용해도: 물에 잘 녹고 에탄올에는 거의 녹지 않습니다(96%).
식별
첫 번째 식별: B, C.
두 번째 식별: A, C.
A. 박층 크로마토그래피(2.2.27).
테스트 솔루션. 피검물질 25mg을 물 R에 녹이고 같은 용매로 5mL로 희석한다.
참조 솔루션. 황산겐타마이신 CRS 바이알의 내용물을 물 R에 녹이고 동일한 용매로 5mL로 희석합니다.
플레이트: TLC 실리카겔 플레이트 R.
이동상: 동일한 부피의 농축 암모니아 R, 메탄올 R 및 메틸렌 클로라이드 R의 혼합물의 하부 층입니다.
적용: 10μL.
개발: 플레이트의 2/3 이상.
건조: 공기 중에서.
검출: 닌히드린 용액 R1을 분무하고 110℃에서 5분간 가열합니다.
결과: 테스트 용액으로 얻은 크로마토그램의 주요 반점 3개는 기준 용액으로 얻은 크로마토그램의 주요 반점 3개와 위치, 색상, 크기가 유사합니다.
나. 조성시험에서 얻은 크로마토그램을 검토한다.
결과: 시험 용액(b)으로 얻은 크로마토그램에는 기준 용액(a)으로 얻은 크로마토그램의 5개 주요 피크와 동일한 유지 시간을 갖는 5개의 주요 피크가 표시됩니다.
C. 황산염의 반응(a)(2.3.1)을 제공합니다.
테스트
용액 S. 0.8g을 이산화탄소-자유수 R에 녹이고 동일한 용매로 20mL로 희석합니다.
솔루션의 모습. 솔루션 S는 투명하며(2.2.1) 가장 적절한 색상의 참조 솔루션 범위(2.2.2, 방법 II)의 강도 6보다 더 강렬하게 색상이 지정되지 않습니다.
pH(2.2.3): 용액 S의 경우 3.5~5.5.
특정 선광도(2.2.7): + 107 ~ + 121(무수 물질).
2.5g을 물 R에 녹이고 동일한 용매로 25.0mL로 희석합니다.
구성. 액체 크로마토그래피(2.2.29): 겐타마이신 C1, C1a, C2, C2a 및 C2b로 인한 피크만 고려하여 정규화 절차를 사용합니다.
테스트 솔루션(a). 이동상에 검사할 물질 25.0mg을 녹이고 이동상을 넣어 25.0mL로 희석합니다.
테스트 솔루션(b). 이동상을 사용하여 테스트 용액(a) 5.0mL를 25.0mL로 희석합니다.
참조 솔루션(a). 이동상에서 피크 식별 CRS(불순물 B 함유)를 위해 겐타마이신 5mg을 용해하고 이동상을 사용하여 25mL로 희석합니다.
참조 솔루션(b). 시소마이신 황산염 CRS(불순물 A) 20.0mg을 이동상에 용해하고 이동상을 사용하여 20.0mL로 희석합니다.
참조 솔루션(c). 이동상을 사용하여 참조 용액(b) 1.0mL를 100.0mL로 희석합니다.
참조 솔루션(d). 참조 용액(b) 1mL에 시험 용액(a) 5mL를 추가하고 이동상을 사용하여 50mL로 희석합니다.
열:
- 크기: l = 0.25m, Ø= 4.6mm;
- 고정상: 크로마토그래피 R용 옥타데실실릴 실리카 겔(5μm);
- 온도: 35℃.
이동상. 이산화탄소-유리수 R 900mL에 트리플루오로아세트산 R 7.0mL, 펜타플루오로프로판산 R 250.0μL 및 탄산염 4.0mL를 첨가합니다.
수산화나트륨 용액 R, 1~25로 희석된 탄산-유리 수산화나트륨 용액 R을 사용하여 pH 2.6으로 평형화하고 조정합니다. 아세토니트릴 R 15mL를 추가하고 희석합니다.
이산화탄소-자유수 R을 포함한 1000.0mL.
유속: 1.0mL/분
컬럼 후 용액: 1~25로 희석된 탄산수산화나트륨 용액 R을 미리 탈기하고 375μL 폴리머 혼합 코일을 사용하여 컬럼 유출물에 펄스 없이 첨가합니다.
포스트-컬럼 용액의 유속: 0.3mL/분.