셀레노메티오닌
C5H11NO2Se 196.11
(S)-2-아미노-4-(메틸셀레닐)부티르산 [1464-42-2].
정의
셀레노메티오닌은 셀레노메티오닌(C5H11NO2Se)의 NLT 97.0%와 NMT 103.0%를 함유하고 있으며, 셀레늄(Se)의 NLT 39.0%와 NMT 41.0%를 함유하고 있습니다.
식별
• A. 적외선 흡수<197K>
분석
• 절차
이동상: 물에 용해된 일염기성 인산칼륨 6.8g/L. 인산을 사용하여 pH 2.75 ± 0.25로 조정합니다.
시스템 적합성 솔루션: 이동상 내 USP 셀레노메티오닌 RS 0.16mg/mL 및 USP L-메티오닌 RS 0.8mg/mL
표준 용액: 이동상 내 USP 셀레노메티오닌 RS 0.16mg/mL
샘플 용액: 초음파 처리된 이동상의 셀레노메티오닌 0.16mg/mL. 0.45-μm 기공 크기의 멤브레인 필터를 통과합니다.
크로마토그래피 시스템
(크로마토그래피<621>, 시스템 적합성 참조)
모드: LC
검출기: UV 220nm
컬럼: 4.6-mm × 25-cm; 극성 말단 캡핑으로 L1 패킹
유속: 1mL/분
주입 크기: 20 µL
시스템 적합성
샘플: 시스템 적합성 솔루션
[참고-메티오닌과 셀레노메티오닌의 상대 체류 시간은 각각 0.8과 1.0입니다.]
적합성 요구 사항
해결: 메티오닌과 셀레노메티오닌 사이의 NLT 3.0
테일링 인자: 셀레노메티오닌 피크에 대한 NMT 2.0
상대 표준 편차: 셀레노메티오닌 피크에 대한 NMT 2.0%
분석
시료: 표준용액 및 시료용액
섭취한 셀레노메티오닌 부분에서 셀레노메티오닌(C5H11NO2Se)의 비율을 계산합니다.
결과 = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU= 샘플 용액의 피크 응답
rS= 표준 용액의 최대 반응
CS= 표준 용액 내 USP 셀레노메티오닌 RS의 농도(mg/mL)
CU= 시료 용액 내 셀레노메티오닌 농도(mg/mL)
승인 기준: 현재 상태 기준 97.0%-103.0%
불순물
• 중금속, 방법 I<231>: NMT 20ppm
• 나트륨 제한
표준 원액: 염화나트륨에서 얻은 나트륨 10μg/mL, 미리 105℃에서 2시간 동안 건조
표준 용액: 나트륨 0.2, 0.5, 1.0 µg/mL. 2.0, 5.0 및 10.0 mL의 표준 원액을 별도의 100-mL 용량 플라스크에 넣습니다. 각 플라스크에 염화칼륨용액(1 → 5) 2.0 mL와 염산 1.0 mL를 넣고 물로 희석한다.
검액 : 이 약 100mg을 100mL 용량플라스크에 옮기고 염화칼륨용액(1 → 5) 2.0mL 및 염산 1.0mL를 넣어 물로 희석한다.
기기 조건
(분광광도법 및 광산란<851> 참조.)
모드: 원자 흡수 분광 광도법
분석 파장: 589 nm
램프: 중공 나트륨-음극
불꽃: 공기-아세틸렌
분석
샘플: 표준 용액 및 샘플 용액
용액의 흡광도를 결정합니다. 표준액의 흡광도와 농도(나트륨의 µg/mL)를 표시하고 표시된 점에 가장 잘 맞는 직선을 그립니다. 이렇게 얻은 그래프로부터 검액의 나트륨 농도 CNa(μg/mL)를 구하라.
섭취한 셀레노메티오닌 부분에서 나트륨의 백분율을 계산하십시오.
결과 = (CNa/CSA) × F × 100
CNa= 회귀선에서 결정된 시료 용액의 나트륨 농도(μg/mL)
CSA= 시료 용액 내 셀레노메티오닌 농도(mg/mL)
F= 변환 계수, 0.001mg/μg
허용 기준: NMT 0.1%
• 크로마토그래피 순도
표준액 A: USP 셀레노메티오닌표준품 50mg을 10mL 용량플라스크에 옮기고 물 2mL를 첨가하고 필요하면 가온하여 용해한 다음 메탄올을 넣어 희석합니다.
표준용액 B : 표준용액 A 1.0 mL를 100 mL 메스플라스크에 넣고 메탄올을 넣어 표선까지 희석한다.
검액 : 셀레노메티오닌 50 mg을 10 mL 용량플라스크에 옮기고 물 2 mL를 넣고 필요하다면 가온하여 용해한 후 메탄올을 넣어 희석한다.
크로마토그래피 시스템
(크로마토그래피<621>, 시스템 적합성 참조)
모드: TLC
흡수제: 크로마토그래피 실리카겔 혼합물의 0.25-mm 층
적용량: 10 µL
현상용매 : 부탄올, 빙초산, 물(4:1:1)
스프레이 시약: 알코올에 2mg/mL의 닌히드린
분석
검체 : 표준액 A, 표준액 B, 검액
크로마토그래피<621>, 박층 크로마토그래피의 지시에 따라 진행합니다. 반점을 건조시키고 용매 앞부분이 플레이트 길이의 4분의 1만큼 이동할 때까지 현상 용매에서 크로마토그램을 현상합니다. 현상 챔버에서 플레이트를 제거하고 용매 전면을 표시한 다음 용매가 증발하도록 합니다. 스프레이 시약을 뿌리고 110°C에서 10분간 건조하여 플레이트의 얼룩을 찾습니다.
허용 기준: NMT 1.0%. 시료 용액의 주 지점의 RF 값은 표준 용액 A의 RF 값과 일치합니다. 검액의 주반점 이외의 반점은 표준용액 B의 주반점보다 크거나 진하다.
특정 테스트
• 광학 회전, 특정 회전<781S>
샘플 용액: 1N 염산 중 10mg/mL
허용 기준: +17.0 ~ +19.5
• 셀레늄 함량
[주의-셀레늄은 독성이 있습니다. 조심해서 다루세요.]
표준 원액: 최소량의 질산에 금속 셀레늄 1g을 녹입니다. 증발건고하고 물 2 mL를 첨가하여 증발건고한다. 물을 첨가하고 증발 건조시키는 과정을 3회 반복합니다. 잔류물을 3N 염산에 녹이고 1000-mL 메스플라스크에 옮기고 3N 염산으로 표량만큼 희석한다. 이 용액에는 1000 µg/mL의 셀레늄이 포함되어 있습니다.
표준 용액: 셀레늄 20, 50, 100μg/mL. 2.0, 5.0 및 10.0 mL의 표준 원액을 별도의 100-mL 용량 플라스크에 넣습니다. 각 플라스크의 내용물을 물로 희석하여 부피를 늘립니다.
샘플 용액: 물에 용해된 셀레노메티오닌 0.125mg/mL
기기 조건
(분광광도법 및 광산란<851> 참조.)
모드: 원자 흡수 분광 광도법
분석 파장: 196nm
램프: 셀레늄 중공-음극
불꽃: 공기-아세틸렌
공백: 물
분석
샘플: 표준 용액 및 샘플 용액
용액의 흡광도를 결정합니다. 표준액의 흡광도와 농도(셀레늄의 µg/mL)를 도표화하고 도표에 가장 잘 맞는 직선을 그립니다. 이렇게 얻은 그래프로부터 검액의 셀레늄 농도 CSe(μg/mL)를 구하십시오.
섭취한 셀레노메티오닌 부분에서 셀레늄의 비율을 계산합니다.
결과 = (CSe/CSA) × F × 100
CSe= 회귀선에서 결정된 시료 용액 내 셀레늄 농도(μg/mL)
CSA= 시료 용액 내 셀레노메티오닌 농도(mg/mL)
F= 변환 계수, 0.001mg/μg
승인 기준: 현재 상태 기준 39.0%-41.0%
추가 요구 사항
• 포장 및 보관: 잘 밀봉된 용기에 보관하세요.
• USP 참조 표준<11>
USP L-메티오닌 RS
USP 셀레노메티오닌 RS