엔테카비르
C12H15N5O3·H2O 295.29
6H-퓨린-6-온, 2-아미노-1,9-디하이드로-9-[(1S,3R,4S)-4-하이드록시-3-(하이드록시메틸)-2-메틸렌사이클로펜틸]-, 일수화물;
9-[(1S,3R,4S)-4-하이드록시-3-(하이드록시메틸)-2-메틸렌사이클로펜틸]구아닌 일수화물 [209216-23-9]; UNII: 5968Y6H45M.
무수물 277.28
정의
엔테카비르는 일수화물이며 무수물 기준으로 계산된 엔테카비르(C12H15N5O3)의 NLT 98%와 NMT 102%를 함유하고 있습니다.
식별
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• A. 분광학 식별 테스트<197>, 적외선 분광학: 197A 또는 197K (CN 1-May-2020)
B. 검액의 주피크 유지시간은 정량법에서 얻은 표준액의 유지시간과 일치한다.
분석
• 절차
용액 A: 아세토니트릴과 물(3:97)
용액 B: 아세토니트릴
이동상: 표 1을 참조하세요. [참고- 구배 용리 시간은 약 1.0mL의 체류 부피를 갖는 HPLC 시스템에서 설정됩니다.]
표 1 시간(분) 용액 A(%) 용액 B(%)
0 100 0
8 100 0
50 77 23
75 17 83
90 100 0
100 100 0
시스템 적합성 저장 용액: 메탄올 중 USP Entecavir 시스템 적합성 혼합물 RS 1.0mg/mL
시스템 적합성 용액: 시스템 적합성 저장 용액의 용액 A에 포함된 USP Entecavir 시스템 적합성 혼합물 RS 0.2mg/mL
표준 저장 용액: 메탄올에 용해된 USP Entecavir Monohydrate RS 1.0mg/mL. 필요에 따라 초음파 처리합니다.
표준 용액: 표준 원액의 용액 A에 들어 있는 USP Entecavir Monohydrate RS 0.2 mg/mL
샘플 원액: 메탄올 중 1.0mg/mL의 Entecavir. 필요에 따라 초음파 처리합니다.
샘플 용액: 샘플 원액의 용액 A에 포함된 Entecavir 0.2mg/mL
크로마토그래피 시스템
(크로마토그래피<621>, 시스템 적합성 참조)
모드: LC
검출기: UV 254nm
컬럼: 4.6-mm × 25-cm; 5-μm 패킹 L1
유속: 1mL/분
주입량: 10μL
시스템 적합성
샘플: 시스템 적합성 솔루션 및 표준 솔루션
[ 참고- 시스템 적합성 솔루션 구성 요소의 상대적 체류 시간은 표 2를 참조하세요.]
적합성 요구 사항
해결: 엔테카비르 1-에피머와 엔테카비르 사이의 NLT 3.5; 엔테카비르와 8-하이드록시 엔테카비르 사이의 NLT 2.0, 시스템
적합성 솔루션
테일링 인자: entecavir의 경우 0.8-1.5, 시스템 적합성 솔루션
상대표준편차: NMT 1.5%, 표준용액
분석
시료: 표준용액 및 시료용액
복용한 엔테카비르 부분에서 엔테카비르(C12H15N5O3)의 비율을 계산합니다.
결과 = (ru /rs ) × (Cs /Cu ) × 100
ru = 검체 용액의 엔테카비르 최대 반응
rs = 표준액의 엔테카비르 최대 반응
Cs = 표준 용액 내 USP 엔테카비르 일수화물 표준품의 농도(mg/mL)
Cu = 검체 용액 내 엔테카비르의 농도(mg/mL)
허용 기준: 무수물 기준 98%-102%
불순물
• 유기 불순물
용액 A, 용액 B, 이동상, 시스템 적합성 원액, 시스템 적합성 원액, 시료 원액, 시료 용액 및 크로마토그래피 시스템: 분석의 지시에 따라 진행합니다.
표준 원액: 분석의 표준 용액을 사용합니다.
표준 용액: 표준 원액의 용액 A에 들어 있는 USP Entecavir Monohydrate RS 0.2 µg/mL
시스템 적합성
샘플: 시스템 적합성 솔루션 및 표준 솔루션
[ 참고- 시스템 적합성 솔루션 구성 요소의 상대적 체류 시간은 표 2를 참조하세요.]
적합성 요구 사항
해결: 엔테카비르 1-에피머와 엔테카비르 사이의 NLT 3.5; 엔테카비르와 8-하이드록시 엔테카비르 사이의 NLT 2.0, 시스템 적합성 솔루션
테일링 인자: entecavir의 경우 0.8-1.5, 시스템 적합성 솔루션
상대표준편차: NMT 10.0%, 표준용액
분석
시료: 시료용액 및 표준용액
엔테카비르를 복용한 부분에서 각 불순물의 백분율을 계산합니다.
결과 = (ru /rs ) × (Cs /Cu ) × (1/F) × 100
ru = 샘플 용액의 각 불순물의 피크 반응
rs = 표준액의 엔테카비르 최대 반응
Cs = 표준 용액 내 USP 엔테카비르 일수화물 표준품의 농도(mg/mL)
Cu = 검체 용액 내 엔테카비르의 농도(mg/mL)
F = 상대 반응 인자(표 2 참조)
허용 기준: 표 2를 참조하십시오. 0.05% 미만의 피크는 무시하십시오.
표 2
이름 상대 머무름 시간 상대 반응 인자 허용 기준, NMT(%)
푸로엔테카비르 a 0.73 1.0 0.1
엔테카비르 1-에피머 b 0.93 1.0 0.1
엔테카비르 3-에피머 c 0.96 1.0 0.1
엔테카비르 1.0 – -
8-하이드록시엔테카비르 d 1.03 0.67 0.1
엔테카비르 4-에피머 e 1.08 1.0 0.1
8-메톡시 엔테카비르 f 1.27 0.67 0.1
4-디메틸실릴 엔테카비르 g 1.84 1.0 0.1
엔테카비르 관련 화합물 A 3.41 – -
불특정 불순물 – 1.0 0.1
총 불순물 i – - 0.3
a 9-[(3aS,4S,6S,6aR)-3a,6-디히드록시헥사히드로-1H-시클로펜타[c]푸란-4-일]구아닌.
b 9-[(1R,3R,4S)-4-하이드록시-3-(하이드록시메틸)-2-메틸렌사이클로펜틸]구아닌.
c 9-[(1S,3S,4S)-4-하이드록시-3-(하이드록시메틸)-2-메틸렌사이클로펜틸]구아닌.
d 8-하이드록시-9-[(1S,3R,4S)-4-하이드록시-3-(하이드록시메틸)-2-메틸렌사이클로펜틸]구아닌.
e 9-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-(하이드록시메틸)-2-메틸렌사이클로펜틸]구아닌.
f 8-메톡시-9-[(1S,3R,4S)-4-히드록시-3-(히드록시메틸)-2-메틸렌시클로펜틸]구아닌.
g 9-[(1S,3R,4S)-4-하이드록시디메틸실릴-3-(하이드록시메틸)-2-메틸렌사이클로펜틸]구아닌.
h 참고용입니다. 엔테카비르 관련 화합물 A의 한계 시험에서 정량되었습니다.
i 엔테카비르 관련 화합물 A 및 유기 불순물 한도 테스트에서 발견된 모든 불순물의 합계를 포함합니다.
• 엔테카비르 관련 화합물 A의 한도
용액 A: 물에 용해된 0.1%(v/v) 트리플루오로아세트산
용액 B: 아세토니트릴 중 0.1%(v/v) 트리플루오로아세트산
이동상: 표 3을 참조하세요. [ 참고- 구배 용리 시간은 체류 부피가 다음과 같은 HPLC 시스템에서 설정됩니다.
약 1.0mL.]
표 3
시간(분) 용액 A(%) 용액 B(%)
0 65 35
8 53 47
8.1 65 35
11 65 35
표준 용액: 메탄올에 용해된 USP Entecavir 관련 화합물 A RS 2 µg/mL
샘플 용액: 메탄올 중 엔테카비르 1.0mg/mL. 필요에 따라 초음파 처리합니다.
크로마토그래피 시스템
(크로마토그래피<621>, 시스템 적합성 참조)
모드: LC
검출기: UV 254nm
컬럼: 4.6-mm × 5-cm; 5-μm 패킹 L1
온도
자동샘플러: 4°
기둥: 30°
유속: 2mL/분
주입량: 10μL
시스템 적합성
샘플: 표준 용액
적합성 요구 사항
테일링 계수: 0.8-1.5
상대표준편차: NMT 3.0%
분석
시료: 표준용액 및 시료용액
복용한 엔테카비르 부분에서 엔테카비르 관련 화합물 A의 백분율을 계산합니다.
결과 = (ru /rs ) × (Cs /Cu ) × 100
ru = 시료 용액의 엔테카비르 관련 화합물 A의 피크 반응
rs = 표준액의 엔테카비르 관련 화합물 A의 피크 반응
Cs = 표준 용액 내 USP 엔테카비르 관련 화합물 A RS의 농도(mg/mL)
Cu = 검체 용액 내 엔테카비르의 농도(mg/mL)
허용 기준: NMT 0.1%
특정 테스트
• 물 측정<921>, 방법 I, 방법 Ic: 5.5%-7.0%
• 광학 회전<781S>, 절차, 특정 회전
샘플 용액: 디메틸포름아미드와 메탄올(50:50)의 혼합물에 담긴 엔테카비르 10mg/mL
허용 기준: +24° ~ +30°
추가 요구 사항
• 포장 및 보관: 잘 밀봉된 용기에 담아 빛으로부터 보호하여 보관하세요. 실온에서 보관하세요.
• USP 참조 표준<11>
USP 엔테카비르 일수화물 RS
USP 엔테카비르 관련 화합물 A RS
3-벤질-4-실릴 엔테카비르;
9-[(1S,3R,4S)-4-디메틸페닐실릴-3-(벤질옥시메틸)-2-메틸렌시클로펜틸]구아닌.
C27H31N5O2Si 485.65
USP Entecavir 시스템 적합성 혼합물 RS
혼합물에는 엔테카비르 일수화물과 다음 불순물이 포함되어 있습니다(다른 불순물도 존재할 수 있음).
엔테카비르 1-에피머.
8-하이드록시엔테카비르.
8-메톡시엔테카비르.

연락처: Alvin Huang 박사

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