올리스타트
C29H53NO5 495.73
l-류신, N-포르밀-, 1-[(3-헥실-4-옥소-2-옥세타닐)메틸]도데실 에스테르, [2S-[2(R*), 3]]-;
N-포르밀-l-류신, (3S,4S)-3-헥실-4-[(2S)-2-히드록시트리데실]-2-옥세타논 [96829-58-2]과 에스테르.
정의
Orlistat에는 무수용매 기준으로 계산한 C29H53NO5의 NLT 98.0%와 NMT 101.5%가 포함되어 있습니다.
식별
• A. 적외선 흡수<197M>
B. 검액의 주피크 유지시간은 정량법에서 얻은 표준액의 유지시간과 일치한다.
분석
• 절차
[참고-이 분석에서 용액을 준비하거나 담는 데 플라스틱 플라스크를 사용하지 마십시오. ]
이동상: 아세토니트릴, 인산, 물(860:0.05:140)
표준 용액: 이동상에 USP Orlistat RS 0.5mg/mL. 조제 후 즉시 주사하거나 5에 보관한다.
샘플 용액: 이동상에 Orlistat 0.5mg/mL. 조제 후 즉시 주사하거나 5에 보관한다.
크로마토그래피 시스템
(크로마토그래피<621>, 시스템 적합성 참조)
모드: LC
검출기: UV 195
컬럼: 3.9-mm × 15-cm; 4-μm 패킹 L1
유속: 1.0mL/분
주입 크기: 20 µL
시스템 적합성
샘플: 표준 용액
적합성 요구 사항
상대표준편차: NMT 2.0%
분석
시료: 표준용액 및 시료용액
Orlistat 부분에서 Orlistat(C29H53NO5)의 비율을 계산합니다.
결과 = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = 샘플 용액의 피크 응답
rS = 표준 용액의 최대 반응
CS = 표준 용액 내 USP Orlistat RS의 농도(mg/mL)
CU = 시료 용액 내 오를리스타트의 농도(mg/mL)
허용 기준: 무수, 무용제 기준 98.0%-101.5%
불순물
무기 불순물
• 점화 잔류물<281>: NMT 0.1%
• 중금속, 방법 II<231>: 20ppm
유기 불순물
• 절차 1: 오를리스타트 관련 화합물 A의 한계
표준 용액: 아세톤에 용해된 USP Orlistat 관련 화합물 A RS 0.1mg/mL
샘플 용액: 아세톤에 용해된 Orlistat 50mg/mL
크로마토그래피 시스템
(크로마토그래피 <621>, Thin-Layer Chromatography 참조)
모드: TLC
흡착제: 크로마토그래피 실리카겔 혼합물의 0.25mm 층
적용량: 10 µL
현상용매계: 톨루엔과 에틸아세테이트(4:1)
검출 용액: 인몰리브덴산 2.5g과 황산세륨 1g을 100mL 용량 플라스크에 넣고 용해시킨 후 메탄올로 부피만큼 희석합니다.
분석
시료: 표준용액 및 시료용액
플레이트를 꺼내서 충분히 건조시켜주세요. 건조된 판에 검출 용액을 뿌리고 판을 120도 오븐에 30분 동안 넣습니다.
허용 기준: 오르리스타트 관련 화합물 A에 해당하는 시료 용액의 2차 반점은 표준 용액의 해당 반점(0.2%)보다 더 강하지 않습니다.
• 절차 2: 오를리스타트 관련 화합물 B의 한계
표준 용액: 염화메틸렌에 용해된 USP Orlistat 관련 화합물 B RS 0.025mg/mL
샘플 용액: 염화메틸렌 중 Orlistat 50mg/mL
스파이크된 시료 용액: 표준 용액에 Orlistat 50mg/mL
크로마토그래피 시스템
(크로마토그래피<621>, 시스템 적합성 참조)
모드: GC
검출기: 화염 이온화
컬럼: 0.32-mm x 30-m 용융 실리카, 0.25-μm G27 고정상으로 코팅됨
컬럼 온도: 아래 온도 프로그램 표를 참조하십시오.
초기 온도() 온도 변화(/min) 최종 온도() 최종 온도 유지 시간(min)
50 4 170 -
170 30 300 30
온도
인젝터: 270
검출기: 280
운반 가스: 헬륨
유속: 30mL/분
분할 비율: 10:1
주입 크기: 2 µL
시스템 적합성
샘플: 표준 용액
적합성 요구 사항
상대표준편차: NMT 10.0%
분석
샘플: 샘플 용액 및 스파이크 샘플 용액
복용한 오를리스타트 부분에서 오를리스타트 관련 화합물 B의 백분율을 계산합니다.
결과 = [rU/(rSP rU)] × (CS/CT) × 100
rU = 시료 용액의 오르리스타트 관련 화합물 B의 피크 반응
rSP = 스파이크된 샘플 용액의 오르리스타트 관련 화합물 B의 피크 반응
CS = 표준 용액 내 USP 올리스타트 관련 화합물 B RS의 농도(mg/mL)
CT = 스파이크된 샘플 용액 내 오를리스타트의 농도(mg/mL)
허용 기준: 오르리스타트 관련 화합물 B가 NMT 0.05% 발견되었습니다.
• 절차 3
[참고-이 분석에서 용액을 준비하거나 담는 데 플라스틱 플라스크를 사용하지 마십시오. ]
이동상, 표준액, 검액 : 정량방법에 따라 준비한다.
시스템 적합성 솔루션: 이동상 내 USP Orlistat RS 10μg/mL, USP Orlistat 관련 화합물 C RS 0.1μg/mL, USP Orlistat 관련 화합물 D RS 0.25μg/mL
크로마토그래피 시스템
(크로마토그래피<621>, 시스템 적합성 참조)
시스템 적합성 용액의 크로마토그래피를 제외하고 분석 지침에 따라 진행합니다.
시스템 적합성
샘플: 시스템 적합성 솔루션
적합성 요구 사항
신호-대-잡음비: 오를리스타트 관련 화합물 C 및 오를리스타트 관련 화합물 D 피크에 대한 NLT 3
상대 표준 편차: orlistat 피크의 경우 NMT 10.0%
분석
시료: 표준용액 및 시료용액
Orlistat를 채취한 부분에서 각 불순물의 백분율을 계산합니다.
결과 = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = 샘플 용액의 각 개별 불순물에 대한 피크 반응
rS = 표준 용액의 USP Orlistat RS의 피크 반응
CS = 표준 용액 내 USP Orlistat RS의 농도(mg/mL)
CU = 시료 용액 내 오를리스타트의 농도(mg/mL)
F = 불순물 표 1에 제시된 상대 반응 인자
허용 기준: 불순물 표 1을 참조하십시오.
불순물 표 1
이름 상대 머무름 시간 상대 반응 인자 허용 기준, NMT(%)
포르밀류시네아 0.10 4.0 0.2
오르리스타트 관련 화합물C 0.13 33 0.05
올리스타트 개방환 에피머브 0.44 1.0 0.2
오르리스타트 관련 화합물 D* 0.90 - 다음으로 계산됨
절차 4
Orlistat 개방형 링 amidec* 0.90 - 다음으로 계산됨
절차 4
올리스타트 1.00 - -
d-류신 오르리스타트 1.18 1.0 0.2
개별미확인불순물 - 1.0 0.1
* 이 LC 시스템의 Coelutes는 절차 4를 사용하여 결정됩니다.
N-포르밀-l-류신.
b (2S,3R,5S)-5-[(S)-2-포르밀아미노-4-메틸-펜타노일옥시]-2-헥실-3-히드록시-헥사데칸산.
c N-포밀-l-류신(S)-1-[(2S,3S)-2-히드록시-3-[1-페닐-R-에틸카르보모일]노닐]-도데실 에스테르.
d N-포르밀-d-류신(S)-1-[[(2S,3S)-3-헥실-4-옥소-2-옥세타닐]메틸]도데실 에스테르 또는 거울상 이성질체.
• 절차 4: 오를리스타트 관련 화합물 D의 한계
이동상: 메탄올 및 물(83:17)
시스템 적합성 솔루션: 각각 아세토니트릴에 함유된 USP Orlistat RS 4 mg/mL 및 USP Orlistat 관련 화합물 D RS 2.4 µg/mL
표준 용액: 아세토니트릴에 용해된 USP Orlistat RS 5.0mg/mL
샘플 용액: 아세토니트릴 중 Orlistat 5.0mg/mL
크로마토그래피 시스템
(크로마토그래피 621, 시스템 적합성 참조)
모드: LC
검출기: 205nm
컬럼: 4.0-mm × 25-cm; 5-μm 패킹 L7
유속: 0.6mL/분
주입 크기: 20 µL
시스템 적합성
샘플: 시스템 적합성 솔루션
적합성 요구 사항
신호-대-잡음비: 오르리스타트 관련 화합물 D 피크에 대한 NLT 3
상대 표준 편차: orlistat 피크의 경우 NMT 10.0%
분석
시료: 표준용액 및 시료용액
Orlistat를 채취한 부분에서 각 불순물의 백분율을 계산합니다.
결과 = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = 샘플 용액의 각 개별 불순물에 대한 피크 반응
rS = 표준 용액의 USP Orlistat RS에 대한 최대 반응
CS = 표준 용액 내 USP Orlistat RS의 농도(μg/mL)
CU = 시료 용액 내 오를리스타트의 농도(μg/mL)
F = 불순물 표 2에서 얻은 상대 반응 인자
허용 기준: 불순물 표 2를 참조하십시오.
불순물 표 2
이름 상대 머무름 시간 상대 반응 인자 허용 기준, NMT(%)
오를리스타트 관련 화합물 D 0.94 1.0 0.2
올리스타트 1.00 - -
올리스타트 개방형 링 아마디아 1.25 4.3 0.1
N-포르밀-l-류신(S)-1-[(2S,3S)-2-히드록시-3-[1-페닐-R-에틸카르보모일]노닐]-도데실 에스테르.
• 절차 5: 오를리스타트 관련 화합물 E의 한계
완충액: 0.4N 붕산염 용액, pH 10.2로 조정됨
유도체화제: o-프탈데히드(OPA) 용액. [참고-상업적으로 구할 수 없는 경우 유도체화제는 0.4 M 보레이트 완충용액에 3-머캅토프로피온산과 오-프탈디알데히드를 각각 1%씩 첨가하여 제조할 수 있습니다.]
용액 A: 4.1g의 아세트산 나트륨 삼수화물과 40mg의 에틸렌디아민4아세트산(EDTA)을 1-L 용량 플라스크에 옮깁니다. 물 950mL에 녹이고 0.1N 수산화나트륨을 넣어 pH 7.2로 조정한다. 물로 희석하여 용량만큼 희석하고 테트라히드로푸란 2.5 mL를 넣어 섞는다. 필터 및 탈기.
용액 B: 2.7g의 아세트산 나트륨 삼수화물과 40mg의 EDTA를 1-L 용량 플라스크에 옮깁니다. 물 200mL에 녹이고 0.1N 수산화나트륨을 넣어 pH 7.2로 맞춘다. 800 mL의 아세토니트릴, 필터 및 탈기를 추가합니다.
이동상: 아래 기울기 표를 참조하세요.
시간(분) 용액 A(%) 용액 B(%)
0 96.7 3.3
20 60 40
24 0 100
38 0 100
38 96.7 3.3
45 96.7 3.3
표준용액 : USP 오를리스타트 관련 화합물 E RS 약 0.2mg을 칭량하여 20mL 헤드스페이스 바이알에 옮긴다. 4N 수산화나트륨용액 10mL를 넣고 바이알을 닫는다. 바이알을 100℃까지 1시간 동안 가열한 후 실온으로 냉각시킨다. 생성된 용액 2mL를 50mL 용량 플라스크에 옮기고 물로 희석합니다. 이 액 0.5mL에 완충액 2.0mL와 유도체화제 0.5mL를 첨가한다.
검액: 표준액의 지시대로 진행하되, 대신 USP 오를리스타트 관련 화합물 E RS 0.2mg을 대신하여 오를리스타트 25mg을 사용하십시오.
크로마토그래피 시스템
(크로마토그래피<621>, 시스템 적합성 참조)
모드: LC
검출기: 형광 340nm(여기); 450nm(방출)
열
가드: 2.1-mm × 2-cm; 50-μm 패킹 L1
분석: 2.1-mm × 20-cm; 포장 L1
유속: 0.5mL/분
주입 크기: 20 µL
시스템 적합성
샘플: 표준 용액
적합성 요구 사항
상대 표준편차: 오르리스타트 관련 화합물 E 피크에 대한 NMT 6.0%
분석
시료: 표준용액 및 시료용액
Orlistat를 채취한 부분에서 이 불순물의 백분율을 계산합니다.
결과 = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = 시료 용액 내 오르리스타트 관련 화합물 E의 피크 반응
rS = 표준 용액의 USP Orlistat 관련 화합물 E RS에 대한 피크 반응
CS = 표준 용액 내 USP 올리스타트 관련 화합물 E RS의 농도(mg/mL)
CU = 시료 용액 내 오를리스타트의 농도(mg/mL)
합격기준
개별 불순물 : 오르리스타트 관련 화합물 E가 NMT 0.2% 검출됨.
총 불순물: NMT 총 불순물의 1.0%가 발견되었으며, 절차 1, 2, 3, 4 및 5의 결과가 추가되었습니다.
특정 테스트
• 광학 회전, 특정 회전<781>
샘플 용액: 탈수 알코올 중 30mg/mL
허용 기준: 20에서 -48.0과 -51.0 사이
• 수분 측정, 방법 Ic<921>: NMT 0.2%
추가 요구 사항
• 포장 및 보관 : 밀폐용기에 담아 2~8℃에서 보존하세요.
• USP 참조 표준<11>
USP 올리스타트 RS
USP Orlistat 관련 화합물 A RS
USP Orlistat 관련 화합물 B RS
USP Orlistat 관련 화합물 C RS
USP 올리스타트 관련 화합물 D RS
USP Orlistat 관련 화합물 E RS
USP35