정의
비타민 E 폴리에틸렌 글리콜 숙신산염은 d-alpha 토코페릴산 숙신산염과 폴리에틸렌 글리콜의 에스테르화에 의해 형성된 혼합물입니다. 에스테르 혼합물은 주로 모노에스테르화 폴리에틸렌글리콜과 소량의 디에스테르화 폴리에틸렌글리콜로 구성된다. NLT 25.0%의 d-alpha 토코페롤(C29H50O2)이 포함되어 있습니다.
식별
• A. 가스 크로마토그래피 식별 시험
분석: 알파 토코페롤 함량 테스트의 지시에 따라 진행합니다.
허용 기준: 시료 용액의 주요 피크 유지 시간은 표준 용액의 유지 시간과 일치합니다.
구성
• 알파토코페롤 함량
용매 : 알코올 1L에 페놀프탈레인시액 0.25mL
내부 표준 용액: 이소옥탄 중 에틸 아라키데이트 12mg/mL
표준용액: USP 알파토코페롤RS 32.5mg을 적합한 반응플라스크에 옮긴다. 피리딘 2mL와 N,O-비스(트리메틸실릴)트리플루오로아세트아미드 0.5mL를 1% 트리메틸클로로실란과 함께 넣고 플라스크를 100도에서 10분 동안 가열합니다. 플라스크를 식힌 후 내부표준용액 5.0 mL, 이소옥탄 20 mL를 넣고 흔들어 섞는다.
검액 : 비타민E 폴리에틸렌글리콜숙신산염 0.100~0.160g에 해당하는 양을 60℃에서 녹여 나사캡이 달린 배양관(길이 약 20cm, 직경 2.5cm)에 옮긴다. 40~50mg의 아스코르브산과 몇 개의 비등 칩을 추가한 다음 용매 20mL를 추가합니다. [참고-내용물이 나오지 않도록 용액을 천천히 환류하십시오.] 100~150으로 설정된 가열 블록에 튜브를 놓습니다. 시료가 완전히 용해되면 수산화칼륨 0.25g을 첨가하고 30분간 계속 환류시킨다. 불을 끄고 내용물이 여전히 뜨거울 때 분홍색이 사라질 때까지 염산 1~2 mL를 한 방울씩 넣는다. [주의-발열반응. 튀는 것을 방지하기 위해 산이 튜브 내부로 흘러내리도록 하십시오.] 튜브를 식힌 다음, 물 20mL로 튜브의 측면을 씻어냅니다. 내부표준용액 5.0mL를 첨가하고 뚜껑을 닫은 후 흔들어 완전히 혼합되도록 합니다. 두 개의 서로 다른 층이 형성될 때까지 튜브를 세워 두십시오. 상부 층의 2.5-3.5 mL를 적합한 반응 플라스크로 옮기고 피리딘 2.0 mL에 이어 N,O-비스(트리메틸실릴)트리플루오로아세트아미드 2.5 mL를 1% 트리메틸클로로실란과 함께 첨가합니다. 플라스크를 100도에서 10분 동안 가열합니다. 식힌 다음 이소옥탄 12mL를 첨가한다.
크로마토그래피 시스템
(크로마토그래피 621, 시스템 적합성 참조)
모드: GC
검출기: 화염 이온화
컬럼: 0.25-mm × 15-m 용융실리카 모세관; 상 G27의 0.25-μm 필름으로 코팅됨
온도
인젝터: 280
감지기: 345
컬럼: 표 1을 참조하세요.
표 1
초기 온도(°) 온도 변화(°/min) 최종 온도(°) 최종 온도 유지 시간(min)
260 20 340 1
운반 가스: 헬륨
유속: 1.5mL/분
주입 크기: 1 µL
주입 유형: 분할 비율, 200:1
시스템 적합성
샘플: 표준 용액
적합성 요구 사항
테일링 인자: 알파 토코페롤 피크의 경우 NMT 2.0
상대 표준 편차: 내부 표준 피크 면적에 대한 알파 토코페롤 피크 면적의 비율에 대해 NMT 2.0%
분석
시료: 표준용액 및 시료용액
비타민 E 폴리에틸렌 글리콜 숙신산염 섭취량 중 d-알파 토코페롤(C29H50O2)의 비율을 계산하세요.
결과 = (RU/RS) × (WS/WU) × 100
RU= 시료 용액의 내부 표준 비율(알파 토코페롤의 피크 면적/내부 표준의 피크 면적)
RS= 표준용액의 내부 표준 비율(알파 토코페롤의 피크 면적/내부 표준의 피크 면적)
WS= 표준용액 제조에 사용된 USP 알파 토코페롤 RS의 중량(mg)
WU= 시료용액 제조에 채취한 비타민E 폴리에틸렌글리콜숙신산염의 중량(mg)
허용 기준: NLT 25.0%
특정 테스트
• 광학 회전, 특정 회전 781S
[참고-이 테스트는 비누화 후 d-알파 토코페롤을 식별합니다.]
검액 : 60℃에서 녹인 비타민E폴리에틸렌글리콜숙신산염 0.9g을 캡이 달린 적당한 시험관에 넣고 알코올 10.0mL에 녹인다. 100-105로 설정된 가열 블록에 튜브를 놓습니다. [참고-용액이 흘러나오지 않도록 천천히 환류시키십시오. ] 시료가 완전히 용해되면 수산화나트륨 펠렛 2~3개를 넣고 30분간 계속 환류시킨다. 불을 끄고 내용물이 여전히 뜨거울 때 페놀프탈레인을 지시약으로 하여 물과 염산혼합액(1:1) 10 mL를 분홍색이 사라질 때까지 천천히 넣어 중화한다. [주의-발열반응. 튀는 것을 방지하기 위해 산성 용액이 튜브 내부로 흘러내리도록 하십시오.] 튜브를 식힌 후 뚜껑을 닫고 내용물이 잘 섞일 때까지 흔드십시오. 25.0 mL의 헵탄을 첨가하고 뚜껑을 닫은 후 1분간 흔들어 완전히 혼합되도록 합니다. 두 개의 서로 다른 층이 형성될 때까지 튜브를 세워 두십시오. 상단 층을 깨끗하고 건조한 배양 튜브로 옮긴 다음 회수된 용액에 물 10.0 mL를 첨가합니다. 뚜껑을 닫고 흔들어서 층이 분리되도록 하십시오. 상층을 깨끗하고 건조한 튜브로 옮깁니다. 0.2 M 수산화나트륨 10.0 mL에 페리시안화칼륨 2 g을 녹인 페리시안화칼륨용액 10.0 mL를 넣고 마개를 닫는다. 45초 동안 세게 흔든 다음 30분 동안 층이 분리되도록 놔둡니다. 상단 헵탄 층이 투명하면 특정 회전에 대한 측정을 진행합니다. 명확하지 않은 경우에는 무수황산나트륨으로 건조시킨 후 시험을 진행한다. [참고-알파토코페롤 함량 시험 결과를 이용하여 비회전율을 계산합니다.]
허용 기준: NLT +24.0
• 물에 대한 용해도
샘플: 녹인 비타민 E 폴리에틸렌 글리콜 숙신산염 20g
분석: 자석 교반기 위의 유리 용기에 샘플을 놓습니다. 즉시 끓는 물 80mL를 넣고 저어준다. 계속 저으면서 실온으로 냉각시킵니다.
허용 기준: 솔루션은 3시간 이내에 명확해집니다.
• 산가
샘플: 비타민 E 폴리에틸렌 글리콜 숙신산염 1g
분석: 0.1N 수산화나트륨을 사용하여 페놀프탈레인으로 중화된 알코올과 에테르(1:1) 혼합물 25mL에 샘플을 녹입니다. 페놀프탈레인시액 0.5 mL를 넣고 30초 동안 흔들어 준 후 용액이 희미한 분홍색을 띌 때까지 0.10 N 수산화나트륨용액으로 적정한다.
허용 기준: NMT 0.027 mEq/g, 0.10 N 수산화나트륨의 NMT 0.27 mL에 해당
추가 요구 사항
• 포장 및 보관: 밀폐용기에 담아 빛으로부터 보호하여 보관하십시오.
• 라벨링: 라벨링은 d-alpha 토코페롤 함량을 mg/g 단위로 나타냅니다.
• USP 참조 표준 11
USP 알파 토코페롤 RS